第191章 遇到困难，找江河(1/3)
南医大这边。江河不语,只是一味做项目。
实验室中,连易向晚都不讲笑话了,足以见得事情的严重程度。
这样也挺好,效率很高。
miRNA早筛项目完成的进度条,正在迅速向前推进
15%......18%......21%......
要是追女生也有这么明确的进度条就好了。
然而,科研不可能总是一帆风顺,尤其江河不在的时候。
这日下午,王教授坐镇推进逆转录和PCR扩增环节。
问题出现:
荧光定量PCR的扩增曲线呈现出杂乱状态,而更糟糕的是溶解曲线,出现了好几个杂乱的双峰。
蔡卓群叹了口气:“非特异性扩增严重,有引物二聚体。”
陈浩在旁,也稍微显得有些失落。
基本上,做出这种曲线,就意味着这批数据全废了.......
蔡卓群:“王教授,您看这怎么处理?”
王晓晴分析:“茎环结构的自由能太低,导致构象过于稳定,如果在现有的反应体系下,常规的提高退火温度已经没用了。”
蔡卓群点点头:“那我们需要重新设计引物序列吗?可是如果要重新设计,得耽误很多时间。’
王晓晴皱着眉头。
她一时间也没什么好的办法。
第一反应是通过调整体系的镁离子浓度,或者重新设计巢式PCR的引物结构来从根本上解决非特异性结合。
但似乎,都需要耗费大量的时间去重新摸索。
就在这时。
江河回来了。
他察觉到气氛不对,随口问道:“怎么了?”
“老江,遇到麻烦了,扩增曲线乱了,引物二聚体和非特异性扩增把真实信号盖住了,王教授正在想怎么调整引物结构。”
江河走过去,看了一眼之后,淡然道:“去拿一瓶DMSO(二甲基亚砜)过来。”
众人一愣。
王晓晴也转头看向他。
江河解释:“这套引物的GC含量在65%以上,自身容易形成复杂的二级结构,这很常见,重做引物太费事了,直接在PCR的反应体系里,加入终浓度为5%的DMSO即可。”
蔡卓群愣了一下:“DMSO?有机溶剂?”
“对,DMSO能强效破坏碱基对之间的氢键,再把退火温度往下调1.5度,直接跑。”
众人立刻开始按江河所说的去做。
虽然很多人并没有在短时间内听懂这个原理。
但是哪怕刚入组的王教授都清楚地知道一件事:
在这个项目组里,听江河的总是没错的。
事实证明,
江河的方案再次正确。
王晓晴面无表情地把自己的草稿纸揉成一团,扔进废纸篓。
陈浩心中忍不住骂了一句:太他妈帅了。
刚才王教授苦思冥想的难题,老江走进来,看了一眼就直接解决了。
什么概念?
你俩谁是谁老师?
江河倒是没觉得有什么。
前世他早就把这套胰腺早筛相关问题翻来覆去研究了无数遍了。
出现自己解决不了的情况,那才怪了。
接下来的几天,
实验室宿舍两点一线。
眼